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廣西柳州市融水苗族自治縣桿洞鄉(xiāng)烏英苗寨坐落在桂黔交界的大苗山深處，交通不便，資源匱乏。今年以來，烏英苗寨在柳州市柳江區(qū)和融水苗族自治縣的支持下，依托兩地非遺美食文化資源和現(xiàn)代農(nóng)業(yè)特色產(chǎn)業(yè)，積極探索產(chǎn)業(yè)發(fā)展新路子，與柳江區(qū)幫扶企業(yè)合作推出特色美食產(chǎn)品，讓當?shù)靥厣巢脑谵r(nóng)業(yè)科技的賦能下，走出深山，走向市場，帶動村民實現(xiàn)就業(yè)和增收。這項歷經(jīng)近10年探索的研究，首次揭示了乙酰輔酶A作為“代謝信使”的非經(jīng)典功能，突破傳統(tǒng)認知，發(fā)現(xiàn)其可直接調(diào)控線粒體自噬，為克服胰腺癌KRAS抑制劑耐藥提供了全新治療靶點，在代謝生物學與腫瘤學交叉領(lǐng)域取得突破性進展。{p}具體而言，細胞在營養(yǎng)匱乏時，名為“乙酰輔酶A”的“神秘信使”出動，它會繞過科學家們熟知的AMPK和mTOR這兩條營養(yǎng)感知的“經(jīng)典主干道”，獨辟蹊徑地將“饑餓”信號直抵細胞能量工廠——線粒體，指揮“哨兵”NLRX1作出響應(yīng)。這項發(fā)現(xiàn)不僅解釋了適度饑餓如何觸發(fā)身體的積極反應(yīng)，還將為未來對抗代謝性疾病、癌癥乃至延緩衰老開辟了一條充滿想象的全新研究道路。{p}復(fù)旦大學基礎(chǔ)醫(yī)學院/腫瘤研究所教授雷群英回憶，2016年年底她就與團隊成員立下“flag”：要做不依賴經(jīng)典代謝感知通路的創(chuàng)新研究。團隊模擬人體“溫和饑餓”環(huán)境，用接近人體過夜饑餓的營養(yǎng)成分配制培養(yǎng)基。實驗結(jié)果顯示，線粒體自噬顯著啟動，然而此時AMPK和mTOR這兩個公認的“細胞營養(yǎng)感知管家”并沒有反應(yīng)。{p}這一突破性發(fā)現(xiàn)為團隊注入了巨大的信心。然而，為了說服審稿人，還需要找到更多堅實的證據(jù)，明確乙酰輔酶A發(fā)揮作用的落腳點。{p}腫瘤研究所助理研究員張一凡說：“為了獲取足夠的數(shù)據(jù)，我們開啟了‘瘋狂’養(yǎng)細胞模式，實驗室的細胞柜里擺滿了培養(yǎng)皿，最多的時候同時養(yǎng)了200盤細胞。”{p}團隊動用了全基因組CRISPR/Cas9篩選技術(shù)，在兩萬多個基因中進行“大海撈針”式搜索，最終精準鎖定了關(guān)鍵蛋白NLRX1。{p}雷群英團隊展現(xiàn)出了敏銳的科學直覺。他們首先排除了乙酰輔酶A的經(jīng)典功能之一“乙酰化修飾”途徑，轉(zhuǎn)而大膽推測：兩者之間可能存在一種更為直接的“對話”。{p}為了印證這一猜想，團隊設(shè)計了一場“分子釣魚”：使用帶有生物素標記的乙酰輔酶A作為“釣餌”，在細胞的復(fù)雜環(huán)境中進行“拉拽實驗”。結(jié)果令人振奮——NLRX1果真被成功“釣”了上來，確鑿證實兩者能夠直接結(jié)合。{p}團隊乘勝追擊，通過更為精密的放射性配體結(jié)合實驗，為這場“對話”測量出了精確的“親和力指數(shù)”。數(shù)據(jù)顯示，該指數(shù)恰好處于細胞內(nèi)乙酰輔酶A的生理濃度范圍，并且在與琥珀酰輔酶A、丙二酰單酰輔酶A等一眾“長相相似”的分子競爭中，乙酰輔酶A與NLRX1的結(jié)合最強。{p}營養(yǎng)充足時，高濃度乙酰輔酶A如同“分子剎車”，精確地嵌入NLRX1的LRR結(jié)構(gòu)域，將其牢牢鎖定在“休眠”狀態(tài)，阻止線粒體自噬啟動。{p}當營養(yǎng)匱乏或藥物應(yīng)激時，乙酰輔酶A濃度下降，“剎車”隨之松開，重獲自由的NLRX1立刻改變自身構(gòu)象并集結(jié)成隊，主動招募自噬蛋白LC3，啟動對問題線粒體的選擇性清除。{p}為了獲取實證，團隊構(gòu)建了無法結(jié)合乙酰輔酶A的NLRX1突變體。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，這個“失靈的剎車”導(dǎo)致線粒體自噬在營養(yǎng)充足時也變得異常活躍，就像一輛油門卡死的汽車。這一實驗為乙酰輔酶A與NLRX1的相互作用提供了無可辯駁的證明。{p}盡管KRAS抑制劑的問世為癌癥治療帶來曙光，但耐藥性卻成為臨床的“老大難”問題。團隊發(fā)現(xiàn)，狡猾的腫瘤細胞在KRAS抑制劑面前，竟啟動了一套意想不到的“自我救護”機制：藥物會下調(diào)ACLY蛋白，導(dǎo)致細胞內(nèi)乙酰輔酶A水平下降，這一變化意外地激活了以NLRX1為核心的線粒體自噬通路。通過“大掃除”般清理掉受損的線粒體，腫瘤細胞成功減輕了藥物帶來的氧化應(yīng)激，從而逃避殺傷、產(chǎn)生耐藥。{p}這一機制的破解，直接指明了全新的治療方向。實驗證實，敲除NLRX1或使用線粒體自噬抑制劑Mdivi-1，能顯著增強KRAS抑制劑的抗腫瘤效果。這意味著，針對“乙酰輔酶A-NLRX1”軸的聯(lián)合治療策略，有望成為克服KRAS突變腫瘤耐藥的新方向，為癌癥患者帶來新的治療希望。{p}多學科積淀賦予了團隊“另辟蹊徑”的智慧。腫瘤研究所2020級博士生申曉說：“當我們坐在一起交流討論，就會碰撞出很多新的想法，難題也就迎刃而解了。”{p}團隊沒有死磕單一技術(shù)，而是靈活運用突變體實驗、親和力測定和交聯(lián)聚合等多種生化手段，突破了膜蛋白結(jié)合驗證、全基因組篩選等技術(shù)難題，完成了兩萬余個基因的無偏篩選，構(gòu)建了堅實的間接證據(jù)鏈，最終用扎實的數(shù)據(jù)說服了《自然》期刊的審稿專家。
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